Таҳияи усули ғайримустақими ELISA барои муайян кардани синдроми дарунравии шадиди хук антитело IgG коронавирус дар асоси протеини рекомбинатии хӯша

Синдроми дарунравии шадиди хук (SADS-CoV) як коронавируси нав кашфшудаи патогении рӯдаи хук мебошад, ки метавонад дар хукбачаҳои навзод дарунравии обдорро ба вуҷуд орад ва ба саноати хук зарари назарраси иқтисодӣ расонад.Дар айни замон, ягон усули мувофиқи серологӣ барои арзёбии самаранокии сирояти SADS-CoV ва ваксина вуҷуд надорад, аз ин рӯ зарурати фаврии истифодаи таҳлили самараноки иммуносорбенти ферментӣ (ELISA) барои ҷуброни ин норасоӣ вуҷуд дорад.Дар ин ҷо, як плазмиди рекомбинантӣ, ки сафедаи SADS-CoV-ро ифода мекунад, ки бо домени IgG Fc инсон омехта шудааст, барои тавлиди бакуловируси рекомбинантӣ сохта шудааст ва дар ҳуҷайраҳои HEK 293F ифода шудааст.Протеини S-Fc бо қатрони сафедаи G тоза карда мешавад ва реактивиро бо антителоҳои зидди инсон Fc ва анти-SADS-CoV нигоҳ медорад.Сипас протеини S-Fc барои таҳияи ELISA бавосита (S-iELISA) ва оптимизатсияи шароити реаксияи S-iELISA истифода шуд.Дар натиҷа, тавассути таҳлили арзиши OD450nm 40 хунобаи манфии SADS-CoV, ки бо таҳлили иммунофлуоресцентӣ (IFA) ва blotting ғарбӣ тасдиқ карда шудааст, арзиши буриш 0,3711 муайян карда шуд.Коэффисиенти тағирёбанда (CV) 6 зардоби мусбати SADS-CoV дар дохили ва байни даврони S-iELISA ҳама камтар аз 10% буд.Санҷиши байниреактивӣ нишон дод, ки S-iELISA бо дигар хунобаҳои вируси хук ягон реактивӣ надорад.Илова бар ин, дар асоси ошкор кардани 111 намунаи хунобаи клиникӣ, сатҳи умумии мувофиқати IFA ва S-iELISA 97,3% буд.Санҷиши безараргардонии вирус бо 7 арзишҳои гуногуни OD450nm хуноба нишон дод, ки арзиши OD450nm аз ҷониби S-iELISA муайяншуда бо санҷиши безараргардонии вирус робитаи мусбат дорад.Нихоят, S-iELISA дар 300 намунаи зардоби фермаи хук гузаронида шуд.Маҷмӯаҳои тиҷоратии дигар энтеровирусҳои хук нишон доданд, ки сатҳи мусбати IgG аз SADS-CoV, TGEV, PDCoV ва PEDV мутаносибан 81,7%, 54% ва 65,3% буд., 6 фоизро ташкил дод.Натиҷаҳо нишон медиҳанд, ки S-iELISA мушаххас, ҳассос ва такроршаванда аст ва метавонад барои ошкор кардани сирояти SADS-CoV дар саноати хук истифода шавад.Ин мақола бо ҳуқуқи муаллиф ҳифз карда шудааст.ҳамаи ҳуқуқ маҳфуз аст.


Вақти фиристодан: июн-22-2021